Исследование Окрашивание миелопероксидазы улучшает диагностику заболеваний крови

Окрашивание миелопероксидазой (MPO), также известное как окрашивание лейкоцитной пероксидазой (POX), является широко используемым методом цитохимического окрашивания.эта методика определяет внутриклеточную активность пероксидазы для диагностики гематологических заболеваний, особенно в классификации лейкемии.

Окрашивание MPO основывается на каталитической реакции внутриклеточной пероксидазы.Йод сочетается с красителем Райта-Гимессы, создавая цветные гранулы в цитоплазме, которые показывают распределение пероксидазы под микроскопией.позволяет MPO окрашивание различать между ними.

Стандартное окрашивание MPO требует специальных наборов реагентов для обеспечения точности и надежности.

• Раствор А: раствор эозина- Кислый краситель, который окрашивает цитоплазму в красный или розовый цвет
• Решение Б: Azure II- Основной краситель, который окрашивает ядра в синий или фиолетовый цвет.
• Раствор C: буфер PBS йодидом калия- Содержит субстрат реакции пероксидазы и поддерживает стабильность pH
• Решение D: окраска Райта-Гимессы- Двухцелевое окрашивание, которое улучшает морфологию клеток.

Комплекты доступны в различных размерах (конфигурации с 5 тестами, 20 тестами и 100 тестами) для удовлетворения различных лабораторных потребностей.

1. Приготовление рабочего раствора: Смешайте раствор С с раствором D (обычно в соотношении 1,0 мл: 250 мкл).
2. Фиксация мазка: Подготовленные мазки костного мозга или крови фиксируют метанолом или этанолом в течение 5-10 минут.
3. Окрашивание: Фиксированные мазки погружают в рабочий раствор в течение 5-10 минут, контролируя температуру и влажность.
4. Промывка: Осторожно промыть с помощью дистиллированной воды или буфера PBS, чтобы удалить избыточное пятно.
5. Противоокрашивание(необязательно): использовать гематоксилин для усиления ядерного контраста.
6. Сушка: Сушите на воздухе или используйте сушилку.
7. Микроскопия: Исследуйте окрашенные мазки для оценки активности и распределения пероксидазы.

Интерпретация результатов требует специализированной экспертизы.

• Положительная реакция: красно-коричневые до темно-синих цитоплазматических гранул (слабая против сильной положительности).
• Отрицательная реакция: Синяя цитоплазма без гранул и однородно фиолетово-красные ядра.
• Эозинофилы: проявляют синий цвет, иногда с внеклеточными иглообразными кристаллами.

• Классификация лейкемии: отличает миелоидный (МПО- положительный) от лимфоидного (МПО- отрицательный) лейкоза, направляя решения о лечении.
• Диагноз острый миелоидный лейкоз (AML): подтверждает миелоидное происхождение и подтипирование СПИДа, с различными показателями положительности, указывающими на различные подтипы ОМЛ.
• Оценка миелодиспластического синдрома (MDS): Оценивает клеточную зрелость и дифференциацию, с аномальными моделями MPO, предполагающими MDS.
• Другие гематологические заболевания: полезен при диагностике хронической миелоидной лейкемии и миелофиброза.

• Качество реагента и условия хранения
• Строгое соблюдение протокола
• Правильная подготовка мазка
• Оптимальное время окрашивания
• Экспертная микроскопическая оценка патологами

Технологический прогресс продолжает улучшать окрашивание MPO. Иммуногистохимия теперь сочетает MPO с иммунными маркерами для большей точности, в то время как цитометрия потока позволяет количественно обнаруживать MPO.По мере развития этого классического цитохимического метода, она обещает внести еще больший вклад в гематологическую диагностику и лечение.